Đánh giá hiệu suất của Easy Plate EB (để đếm Enterobacteriaceae)

Kentaro Takenaka¹, Natsuki Okochi¹, Takeo Suzuki¹và Tetsuya Mori²

(1) Tập đoàn Kikkoman, (2) Quỹ Tokyo Kenbikyo-in

Easy Plate EB đã được giới thiệu tại Hội nghị lần thứ 45 của Hiệp hội Vi sinh Thực phẩm Nhật Bản. Áp phích có thể tải xuống (PDF) tại liên kết bên dưới.

Áp phích Đánh giá hiệu suất của Easy Plate EB (để đếm Enterobacteriaceae) (PDF)

Tóm tắt

Giới thiệu

Enterobacteriaceae, bao gồm cả coliform lên men lactose và các mầm bệnh chính không lên men lactose như Salmonella, Shigella, và Yersinia, được công nhận rộng rãi là chỉ số vệ sinh quan trọng. Tại Nhật Bản, chúng đã được chỉ định là chỉ số vệ sinh theo Luật Vệ sinh Thực phẩm từ năm 2011 cho tiêu chuẩn thành phần của thịt sống. Phương pháp tiêu chuẩn ISO 21528-2:2017 khuyến nghị sử dụng môi trường Violet Red Bile Glucose Agar (VRBG). Tuy nhiên, việc chuẩn bị VRBG tốn thời gian và công sức, khiến nó không hiệu quả cho kiểm tra thường quy.

Mục đích

Để giải quyết những hạn chế này, chúng tôi đã phát triển Easy Plate EB (E-EB), một môi trường đơn giản hóa để phát hiện Enterobacteriaceae và một thuật toán mới cho Colony Counting System (CCS) for Easy Plate. Nghiên cứu này đánh giá hiệu suất của E-EB và thuật toán CCS so với VRBG và phương pháp đếm thủ công.

Phương pháp

Hiệu suất của E-EB được so sánh với VRBG bằng cách sử dụng nhiều mẫu thực phẩm, bao gồm thịt sống và rau. Số lượng vi khuẩn được phân tích và khuẩn lạc được phân lập và xác định bằng hệ thống Bruker MALDI Biotyper Sirius. Đối với đánh giá thuật toán CCS, 222 hình ảnh từ 31 mẫu thực phẩm đã được phân tích, bao gồm 126 hình ảnh có thể đếm và 96 hình ảnh NC (Không thể đếm). Độ chính xác của CCS được đánh giá về tương quan với đếm thủ công, xác định kết quả âm tính và tính nhất quán phát hiện NC.

Kết quả

Độ nhạy của E-EB: E-EB cho thấy tương quan cao với VRBG nhưng có độ nhạy phát hiện cao hơn ở một số mẫu, chẳng hạn như thịt heo ướp lạnh, salad, hành lá và bánh tortilla. Trong số 40 khuẩn lạc được phân lập, 37 khuẩn lạc được xác định thuộc họ Enterobacteriaceae bằng phương pháp phết tế bào.
Độ chính xác của CCS: Thuật toán CCS cho thấy tương quan mạnh (R = 0,968) với đếm thủ công và tỷ lệ lỗi thấp (RMSLE = 8,11%). Tất cả 13 đĩa được xác định bằng mắt là âm tính (0 CFU) đều được CCS phân loại chính xác. Đối với xác định NC, CCS phù hợp với kiểm tra trực quan trong 94,6% trường hợp.

Kết luận

Easy Plate EB, kết hợp với CCS, cho thấy độ chính xác và độ nhạy nâng cao để phát hiện Enterobacteriaceae so với VRBG. Thuật toán CCS đảm bảo việc đếm đáng tin cậy đồng thời giảm thời gian kiểm tra, chuẩn hóa quy trình và giảm chi phí tổng thể. Sự kết hợp này cải thiện đáng kể hiệu quả và độ chính xác của kiểm tra vi sinh, trở thành giải pháp đầy hứa hẹn cho các phòng thí nghiệm an toàn thực phẩm.